Citometria în flux este o tehnică de diagnostic și cercetare cunoscută de mulți ani și utilizată pe scară largă în oncologie. Citometria în flux permite ca celulele care formează suspensia într-un flux de lichid laminar sau stratificat să fie examinate cu un dispozitiv numit citometru în flux. Care sunt indicațiile pentru citometria în flux și cum se face?
Citometria în fluxeste folosită în diagnosticul neoplasmelor hematologice deoarece sunt tumori lichide, dar este doar o metodă auxiliară. Cu toate acestea, merită să ne amintim că există un cancer care poate fi diagnosticat doar cu această metodă. Aceasta este leucemie limfocitară cronică.
În alte boli neoplazice, citometria în flux este folosită ca ajutor de diagnostic deoarece arată caracteristici foarte importante ale celulelor neoplazice. Această metodă este folosită și pentru a evalua eficacitatea tratamentului aplicat.
Citometrie în flux - ce arată?
Fluxul de lichid care conține particulele de testat curge cu o viteză constantă (100-2000 de particule pe secundă) prin zona de măsurare a citometrului. Aici, metodele optice sunt folosite pentru a analiza formele, dimensiunile, structura internă a celulelor și conținutul acestora, de exemplu ADN. Toate celulele sunt etichetate optic.
Proprietățile de împrăștiere a luminii laser de către celulele individuale sau componentele acestora (nuclei, cromozomi, mitocondrii) sau fluorescența indusă de acestea sunt utilizate pentru măsurători.
Semnalele optice sunt convertite în semnale electrice care, după analiză, sunt prezentate grafic sub formă de distribuții mono- sau biparametrice.
Citometrul permite, de asemenea, segregarea particulelor după ieșirea din zona de măsurare. Se poate spune că aparatul aranjează (segregă) celule cu aceleași elemente constitutive (sortul preparativ) sau extrage anumite tipuri de celule (sortarea analitică).
Citometria în flux permite studiul caracteristicilor populației celulelor, analiza componentelor celulare (în special cum ar fi acizii nucleici, proteinele, antigenele de suprafață și celulele), activitatea enzimatică, potențialul membranar, activitatea mitocondrială, pH-ul intracelular, transportul ionilor și fluiditatea membranei.
Citometrie în flux - aplicație
Folosit în diagnosticarecitometria în flux permite determinarea fenotipului celulelor neoplazice și a expresiei proteinelor individuale. Pentru a realiza acest lucru, sunt utilizați anticorpi fluorescenți marcați care se leagă într-o manieră caracteristică la antigenele de pe suprafața membranei celulare. Datorită acestui fapt, este posibil să se determine gradul de diferențiere a acestora, originea, markerii prognostici și terapeutici, care facilitează decizia asupra procedurilor diagnostice și terapeutice ulterioare.
O altă aplicație pentru citometria în flux este monitorizarea eficacității tratamentului aplicat prin evaluarea așa-numitelor „boală reziduală”, care este procentul de celule cu fenotipuri asemănătoare tumorilor care rămân după tratament.
Citometria în flux facilitează, de asemenea, cercetarea cancerului. Datorită acestei metode, este posibil să se caute, de exemplu, receptori care se află pe suprafața celulelor neoplazice și pot deveni o țintă pentru tratament.
Metoda vă permite să evaluați activitatea proteinelor în interiorul celulei. De asemenea, este posibil să se evalueze ciclul celular, de exemplu prin determinarea cantității de ADN din celulă.
În cursul proliferării, o celulă trece prin faze din ciclul celular în care dublează cantitatea de ADN. Evaluând această cantitate, este posibil să se indice în ce fază se află celulele, dacă proliferează sau nu sau dacă intră în apoptoză. Cu alte cuvinte, cu ajutorul citometriei în flux poți afla dacă celulele se pregătesc pentru apoptoză, care este procesul morții programate.
Citometria în flux - viitorul
Citometria în flux este cunoscută și utilizată în medicină de câteva zeci de ani. Cu toate acestea, este în mod constant îmbunătățit și creează noi posibilități de diagnostic și cercetare. În prima perioadă de utilizare a acestei metode, a fost posibil doar să se determine dimensiunea și gradul de granularitate al celulelor.
Utilizarea luminii laser în dispozitivele de citometrie în flux vă permite să excitați anumiți markeri fluorescenți și apoi să evaluați emisia acestora. Citometrele moderne permit o creștere semnificativă a numărului de markeri care sunt evaluați la un moment dat, ceea ce se traduce cu siguranță într-o creștere a sensibilității acestei metode.
De aceea este folosit nu numai pentru a diagnostica bolile neoplazice, ci și pentru a evalua eficacitatea tratamentului.
Despre autor
Anna Jarosz Un jurnalist care s-a implicat de peste 40 de ani în popularizarea educației pentru sănătate. Câștigător al multor concursuri pentru jurnaliștii care se ocupă de medicină și sănătate. Ea a primit, printre altele Premiul de încredere „Golden OTIS” la categoria „Media și sănătate”, St. Kamila premiată cu ocaziaZiua Mondială a Bolnavului, de două ori „Crystal Pen” într-o competiție națională pentru jurnaliștii care promovează sănătatea și multe premii și distincții în competițiile pentru „Jurnalistul Medical al Anului” organizate de Asociația Jurnaliştilor pentru Sănătate din Polonia.
Citiți mai multe articole ale acestui autor